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產(chǎn)品名稱:

漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào): 熒光PCR法 產(chǎn)品時(shí)間: 2024-10-17
漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測(cè)試劑盒適用于檢測(cè)病患血液、尿液及病變組織中的漢坦病毒 RNA,適用于漢坦病毒感染的輔助診斷。 【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒對(duì)漢坦病毒基因組保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性的引物和探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)漢坦病毒 RNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。

產(chǎn)品概述

漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測(cè)試劑盒
【產(chǎn)品名稱】 
商品名稱:漢坦病毒通用型(HTV-U)檢測(cè)試劑盒(熒光 PCR 法) 
Name  : Hantavirus Detection Kit(Real-Time PCR Method) 
【包裝規(guī)格】50T/盒 
【預(yù)期用途】 
漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸檢測(cè)試劑盒適用于檢測(cè)病患血液、尿液及病變組織中的漢坦病毒 RNA,適用于漢坦病毒感染的輔助診斷。 【檢驗(yàn)原理】 
本試劑盒對(duì)漢坦病毒基因組保守區(qū)設(shè)計(jì)特異性的引物和探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對(duì)漢坦病毒 RNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。 

【試劑組成】

注: 
1)不同批號(hào)試劑不能混用。 
2)試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測(cè)次數(shù)。 
【儲(chǔ)存條件及有效期】 
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過5 次,有效期12 個(gè)月。 
【適用儀器】 
ABI 、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量PCR 檢測(cè)儀。 
【標(biāo)本采集】 
抽取全血5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管,或采集患者尿液、病變組織。 
【保存和運(yùn)輸】 
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃,但不能超過6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。 
【使用方法】 
1. 樣品處理(樣本處理區(qū)) 
1.1 樣本前處理 
血液:直接取100μL 于滅菌離心管中或取血清100ul 于滅菌離心管中 
尿液:取100μL 于滅菌離心管中; 
組織樣品:稱取組織樣品約 0.5g,置于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,勻漿后取 100μL
于1.5mL 滅菌離心管中; 
1.2 核酸提取 
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提取,請(qǐng)按照試劑說明書進(jìn)行操作。 
2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽性對(duì)照;反應(yīng)管數(shù)每滿10 份,多配制1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,21uL/管。

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。 
4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū)) 
4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi); 
4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為25μL;熒光通道選擇: 
檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇 ROX

選擇 None 即可。 
4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
. 結(jié)果分析判定 
5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。

.2 結(jié)果判斷

陽性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線; 
可疑:檢測(cè)通道 35陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。 
6. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:Ct>38 或無 Ct 值顯示; 
陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且Ct 值≤32;
以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

【生產(chǎn)企業(yè)】 
企業(yè)名稱:上海晅科生物科技有限公司

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